Caracterização de Estirpes Gram-Negativas Isoladas de Queijos e Avaliação da Produção de Substâncias Antimicrobianas

Caracterização de Estirpes Gram-Negativas Isoladas de Queijos e Avaliação da Produção de Substâncias Antimicrobianas

Marinho, Iuri Lourenço; Cupertino, Thomaz Rocha; Damaceno, Hugo Figueiredo Botelho; Freitas Junior, Claudinei Vieira de; Silva, Rodrigo Barcellos Revorêdo; Costa, Leonardo Emanuel de Oliveira; Nascimento, Janaína dos Santos

Abstract:

Agentes infecciosos Gram-negativos como Aeromonas, Escherichia, Salmonella, Yersinia e Pseudomonas são dificilmente inibidos por bacteriocinas produzidas por bactérias Gram-positivas, as mais estudadas atualmente. Devido a este fato, surge a importância do estudo de substâncias antimicrobianas (SAM) produzidas por bactérias Gram-negativas que sejam ativas contra estes micro-organismos. Neste trabalho, cerca de cinqüenta estirpes Gram-negativas foram isoladas de queijo, mas somente as que foram produtoras de algum tipo de SAM foram caracterizadas. Quinze estirpes (Q2, Q3, Q4, Q5, Q15, Q22, Q29, Q33, Q34, Q35, Q37, Q38, Q44, Q45, Q46) mostraram ser produtoras de SAM e foram identificadas através do sistema comercial BactrayAndlt;supAndgt;®Andlt;/supAndgt;, como pertencentes a diferentes espécies como Enterobacter sakazakii, Acinetobacter baumannii, Escherichia coli e Yersinia intermedia. As 15 estirpes produtoras foram submetidas ao antibiograma, onde todas se mostraram resistentes a pelo menos um antibiótico testado. As estirpes Q5, Q29, Q37, Q38, Q44, Q45 e Q46, entretanto, foram resistentes a pelo menos três antibióticos de diferentes classes, apresentando assim, um perfil típico de multi-resistência. As estirpes também foram submetidas à avaliação do perfil plasmidial. Todas as 15 estirpes produtoras de SAM apresentaram diversas formas plasmidiais, sendo a maioria destas com tamanho variando de 1 a 10 kb. Interessantemente, ao se avaliar o potencial de aplicação contra diferentes patógenos associados a alimentos, observou-se que as 15 estirpes, mesmo pertencendo a espécies distintas, apresentaram o mesmo espectro de ação, inibindo todas as estirpes de E. coli e Salmonella testadas. Apesar de restrito, o espectro de ação apresentado pelas estirpes produtoras de SAM é de extrema importância para a área de alimentos, uma vez que E. coli e Salmonella representam as bactérias Gram-negativas mais associadas às DTA’s (doenças transmitidas por alimentos). Buscou-se, então, verificar se as estirpes eram capazes de produzir SAM em meio líquido. Para isso, o sobrenandante das culturas crescidas em caldo foi obtido por centrifugação, filtrado, diluído seriadamente e testado contra as estirpes indicadoras. A estirpe Q3 foi a que apresentou os melhores resultados, apresentando um título de 800 UA/ml. Outros experimentos associados à produção de SAM em meio líquido ainda estão em andamento.

Agentes infecciosos Gram-negativos como Aeromonas, Escherichia, Salmonella, Yersinia e Pseudomonas são dificilmente inibidos por bacteriocinas produzidas por bactérias Gram-positivas, as mais estudadas atualmente. Devido a este fato, surge a importância do estudo de substâncias antimicrobianas (SAM) produzidas por bactérias Gram-negativas que sejam ativas contra estes micro-organismos. Neste trabalho, cerca de cinqüenta estirpes Gram-negativas foram isoladas de queijo, mas somente as que foram produtoras de algum tipo de SAM foram caracterizadas. Quinze estirpes (Q2, Q3, Q4, Q5, Q15, Q22, Q29, Q33, Q34, Q35, Q37, Q38, Q44, Q45, Q46) mostraram ser produtoras de SAM e foram identificadas através do sistema comercial BactrayAndlt;supAndgt;®Andlt;/supAndgt;, como pertencentes a diferentes espécies como Enterobacter sakazakii, Acinetobacter baumannii, Escherichia coli e Yersinia intermedia. As 15 estirpes produtoras foram submetidas ao antibiograma, onde todas se mostraram resistentes a pelo menos um antibiótico testado. As estirpes Q5, Q29, Q37, Q38, Q44, Q45 e Q46, entretanto, foram resistentes a pelo menos três antibióticos de diferentes classes, apresentando assim, um perfil típico de multi-resistência. As estirpes também foram submetidas à avaliação do perfil plasmidial. Todas as 15 estirpes produtoras de SAM apresentaram diversas formas plasmidiais, sendo a maioria destas com tamanho variando de 1 a 10 kb. Interessantemente, ao se avaliar o potencial de aplicação contra diferentes patógenos associados a alimentos, observou-se que as 15 estirpes, mesmo pertencendo a espécies distintas, apresentaram o mesmo espectro de ação, inibindo todas as estirpes de E. coli e Salmonella testadas. Apesar de restrito, o espectro de ação apresentado pelas estirpes produtoras de SAM é de extrema importância para a área de alimentos, uma vez que E. coli e Salmonella representam as bactérias Gram-negativas mais associadas às DTA’s (doenças transmitidas por alimentos). Buscou-se, então, verificar se as estirpes eram capazes de produzir SAM em meio líquido. Para isso, o sobrenandante das culturas crescidas em caldo foi obtido por centrifugação, filtrado, diluído seriadamente e testado contra as estirpes indicadoras. A estirpe Q3 foi a que apresentou os melhores resultados, apresentando um título de 800 UA/ml. Outros experimentos associados à produção de SAM em meio líquido ainda estão em andamento.

Palavras-chave:

DOI: 10.5151/foodsci-microal-271

Como citar:

Marinho, Iuri Lourenço; Cupertino, Thomaz Rocha; Damaceno, Hugo Figueiredo Botelho; Freitas Junior, Claudinei Vieira de; Silva, Rodrigo Barcellos Revorêdo; Costa, Leonardo Emanuel de Oliveira; Nascimento, Janaína dos Santos; "Caracterização de Estirpes Gram-Negativas Isoladas de Queijos e Avaliação da Produção de Substâncias Antimicrobianas", p-9-10. In: Proceedings of the XII Latin American Congress on Food Microbiology and Hygiene [=Blucher Food Science Proceedings, v.1, n.1]. São Paulo: Blucher, 2014.
ISSN 2359201X, DOI 10.5151/foodsci-microal-271