PRODUÇÃO DE UMA MOLÉCULA RECOMBINANTE HÍBRIDA DE DUAS PROTEÍNAS DE Streptococcus pneumoniae: PspA94-PdT

PRODUÇÃO DE UMA MOLÉCULA RECOMBINANTE HÍBRIDA DE DUAS PROTEÍNAS DE Streptococcus pneumoniae: PspA94-PdT

KRASCHOWETZ, S.; FIGUEIREDO, D. B.; CAMPANI JR, G.; SILVA, G. G.; ZANGIROLAMI, T. C.; LEITE, L. C. C.; CABRERA-CRESPO, J.; GONçALVES, V. M.

Artigo:

A baixa cobertura em termos de sorotipos das vacinas atuais contra S. pneumoniae tem levado à busca por novos antígenos que ofereçam proteção independente de sorotipos. Assim, este trabalho propõe a produção de um híbrido das proteínas PspA e pneumolisina geneticamente detoxificada, que mostrou-se imunogênico e protetor em camundongos. Para isso a molécula foi obtida em E. coli com cauda de histidina. Os cultivos foram realizados em reator de 5L e a purificação seguiu as seguintes etapas: ruptura celular em homogeneizador contínuo de alta pressão, precipitação com detergente catiônico CTAB, clarificação, cromatografia de troca aniônica e cromatografia de interação hidrofóbica, alcançando 85% de pureza e recuperação de 4%. A baixa recuperação ocorreu porque o híbrido mostrou-se instável.Duas bandas principais foram observadas na eletroforese, que correspondiam a cada uma das proteínas do híbrido, tal como revelado por Western Blot. Novas construções de híbridos estão sendo elaboradas com espaçadores rígido e flexível a fim de aumentar sua

A baixa cobertura em termos de sorotipos das vacinas atuais contra S. pneumoniae tem levado à busca por novos antígenos que ofereçam proteção independente de sorotipos. Assim, este trabalho propõe a produção de um híbrido das proteínas PspA e pneumolisina geneticamente detoxificada, que mostrou-se imunogênico e protetor em camundongos. Para isso a molécula foi obtida em E. coli com cauda de histidina. Os cultivos foram realizados em reator de 5L e a purificação seguiu as seguintes etapas: ruptura celular em homogeneizador contínuo de alta pressão, precipitação com detergente catiônico CTAB, clarificação, cromatografia de troca aniônica e cromatografia de interação hidrofóbica, alcançando 85% de pureza e recuperação de 4%. A baixa recuperação ocorreu porque o híbrido mostrou-se instável.Duas bandas principais foram observadas na eletroforese, que correspondiam a cada uma das proteínas do híbrido, tal como revelado por Western Blot. Novas construções de híbridos estão sendo elaboradas com espaçadores rígido e flexível a fim de aumentar sua

Palavras-chave:

DOI: 10.5151/chemeng-cobeq2014-1318-19907-147206

Referências bibliográficas

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Como citar:

KRASCHOWETZ, S.; FIGUEIREDO, D. B.; CAMPANI JR, G.; SILVA, G. G.; ZANGIROLAMI, T. C.; LEITE, L. C. C.; CABRERA-CRESPO, J.; GONçALVES, V. M.; "PRODUÇÃO DE UMA MOLÉCULA RECOMBINANTE HÍBRIDA DE DUAS PROTEÍNAS DE Streptococcus pneumoniae: PspA94-PdT", p-1905-1912. In: Anais do XX Congresso Brasileiro de Engenharia Química - COBEQ 2014 [= Blucher Chemical Engineering Proceedings, v.1, n.2]. São Paulo: Blucher, 2015.
ISSN 23591757, DOI 10.5151/chemeng-cobeq2014-1318-19907-147206