DESENVOLVIMENTO DE PROCESSO DE PURIFICAÇÃO DA PROTEÍNA A DE SUPERFÍCIE DO PNEUMOCOCO DO CLADO

DESENVOLVIMENTO DE PROCESSO DE PURIFICAÇÃO DA PROTEÍNA A DE SUPERFÍCIE DO PNEUMOCOCO DO CLADO

FIGUEIREDO, D. B.; CARVALHO, E.; KRASCHOWETZ, S.; ZANARDO, R. T.; SILVA, G. G.; CAMPANI, G.; ZANGIROLAMI, T. C.; CABRERA-CRESPO, J.; GONÇALVES, V. M.

Artigo:

S. pneumoniae provoca doenças com elevada mortalidade infantil como pneumonia, meningite e sepse, assim buscam-se vacinas alternativas mais eficazes. Neste trabalho desenvolveu-se um processo escalonável de purificação do fragmento recombinante da PspA do clado 4 para uso em uma nova vacina, que consistiu das etapas: ruptura celular em homogeneizador contínuo de alta pressão, precipitação com detergente CTAB, clarificação, cromatografia de troca aniônica, crioprecipitação a pH4,0 e cromatografia de troca catiônica. PspA4Pro foi obtida com pureza Andgt;97% e recuperação de 30%. A eliminação final do lipopolissacarídeo (contaminante que causa febre) foi feita em resina de polilisina. Espectros de dicroísmo circular mostraram estrutura secundária correta da PspA4Pro purificada, bem como estabilidade térmica e a variações de pH. A atividade de PspA4Pro foi confirmada em ensaio de ligação à lactoferrina. Portanto, o processo é adequado à obtenção de PspA4Pro com as características requeridas para uso humano.

S. pneumoniae provoca doenças com elevada mortalidade infantil como pneumonia, meningite e sepse, assim buscam-se vacinas alternativas mais eficazes. Neste trabalho desenvolveu-se um processo escalonável de purificação do fragmento recombinante da PspA do clado 4 para uso em uma nova vacina, que consistiu das etapas: ruptura celular em homogeneizador contínuo de alta pressão, precipitação com detergente CTAB, clarificação, cromatografia de troca aniônica, crioprecipitação a pH4,0 e cromatografia de troca catiônica. PspA4Pro foi obtida com pureza Andgt;97% e recuperação de 30%. A eliminação final do lipopolissacarídeo (contaminante que causa febre) foi feita em resina de polilisina. Espectros de dicroísmo circular mostraram estrutura secundária correta da PspA4Pro purificada, bem como estabilidade térmica e a variações de pH. A atividade de PspA4Pro foi confirmada em ensaio de ligação à lactoferrina. Portanto, o processo é adequado à obtenção de PspA4Pro com as características requeridas para uso humano.

Palavras-chave:

DOI: 10.5151/chemeng-cobeq2014-1014-21638-150203

Referências bibliográficas

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Como citar:

FIGUEIREDO, D. B.; CARVALHO, E.; KRASCHOWETZ, S.; ZANARDO, R. T.; SILVA, G. G.; CAMPANI, G.; ZANGIROLAMI, T. C.; CABRERA-CRESPO, J.; GONÇALVES, V. M.; "DESENVOLVIMENTO DE PROCESSO DE PURIFICAÇÃO DA PROTEÍNA A DE SUPERFÍCIE DO PNEUMOCOCO DO CLADO", p-1442-1449. In: Anais do XX Congresso Brasileiro de Engenharia Química - COBEQ 2014 [= Blucher Chemical Engineering Proceedings, v.1, n.2]. São Paulo: Blucher, 2015.
ISSN 23591757, DOI 10.5151/chemeng-cobeq2014-1014-21638-150203