ACOMPANHAMENTO REOLÓGICO E MORFOLÓGICO DE CALDOS DE CULTIVOS DE E. coli RECOMBINANTE

ACOMPANHAMENTO REOLÓGICO E MORFOLÓGICO DE CALDOS DE CULTIVOS DE E. coli RECOMBINANTE

SILVA, G. G.; BONOMO, J. H.; JESUS, M. M.; BORGES, C. B.; CAMPANI, G.; ANDRADE, J. V. L.; GONÇALVES, V. M.; BADINO, A. C.; SILVA, A. J.; ZANGIROLAMI, T. C.

Artigo:

A bactéria E. coli é muito empregada para obtenção de proteínas heterólogas utilizadas na produção de fármacos e preparados enzimáticos. Porém, o estresse gerado pelas estratégias de crescimento e de expressão da proteína acarreta mudanças morfológicas no microrganismo, além de afetar a reologia do caldo de cultivo. Essas alterações e seus reflexos na síntese da proteína ainda não foram plenamente estabelecidos. Neste trabalho, avaliou-se a morfologia celular e a reologia dos caldos durante a produção de fragmento de proteína de superfície S. pneumoniae em E. coli. Os experimentos foram realizado em biorreator tipo tanque agitado, utilizando meio definido e IPTG ou lactose como indutores. Empregou-se o modelo de Herschel-Bulkley para descrever a reologia durante o processo de produção, observando-se uma mudança significativa do comportamento reológico do caldo. Constatou-se ainda que a razão entre a concentração celular (em massa seca) e a densidade ótica aumenta ao longo da fase de indução, devido provavelmente ao acúmulo de proteína intracelular. Imagens obtidas por microscopia ótica foram empregadas para caracterização morfológica, indicando o aparecimento de estruturas alongadas durante o cultivo conduzido sob indução por lactose. Os resultados contribuem para ampliar a compreensão do processo de produção de proteínas heterólogas por rE. coli.

A bactéria E. coli é muito empregada para obtenção de proteínas heterólogas utilizadas na produção de fármacos e preparados enzimáticos. Porém, o estresse gerado pelas estratégias de crescimento e de expressão da proteína acarreta mudanças morfológicas no microrganismo, além de afetar a reologia do caldo de cultivo. Essas alterações e seus reflexos na síntese da proteína ainda não foram plenamente estabelecidos. Neste trabalho, avaliou-se a morfologia celular e a reologia dos caldos durante a produção de fragmento de proteína de superfície S. pneumoniae em E. coli. Os experimentos foram realizado em biorreator tipo tanque agitado, utilizando meio definido e IPTG ou lactose como indutores. Empregou-se o modelo de Herschel-Bulkley para descrever a reologia durante o processo de produção, observando-se uma mudança significativa do comportamento reológico do caldo. Constatou-se ainda que a razão entre a concentração celular (em massa seca) e a densidade ótica aumenta ao longo da fase de indução, devido provavelmente ao acúmulo de proteína intracelular. Imagens obtidas por microscopia ótica foram empregadas para caracterização morfológica, indicando o aparecimento de estruturas alongadas durante o cultivo conduzido sob indução por lactose. Os resultados contribuem para ampliar a compreensão do processo de produção de proteínas heterólogas por rE. coli.

Palavras-chave:

DOI: 10.5151/chemeng-cobeq2014-0254-26321-163871

Referências bibliográficas

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Como citar:

SILVA, G. G.; BONOMO, J. H.; JESUS, M. M.; BORGES, C. B.; CAMPANI, G.; ANDRADE, J. V. L.; GONÇALVES, V. M.; BADINO, A. C.; SILVA, A. J.; ZANGIROLAMI, T. C.; "ACOMPANHAMENTO REOLÓGICO E MORFOLÓGICO DE CALDOS DE CULTIVOS DE E. coli RECOMBINANTE", p-399-406. In: Anais do XX Congresso Brasileiro de Engenharia Química - COBEQ 2014 [= Blucher Chemical Engineering Proceedings, v.1, n.2]. São Paulo: Blucher, 2015.
ISSN 23591757, DOI 10.5151/chemeng-cobeq2014-0254-26321-163871