SOLUBILIDADE DA PNEUMOLISINA DESTOXIFICADA (PdT) RECOMBINANTE OBTIDA EM Escherichia coli EMPREGANDO DIFERENTES INDUTORES E MEIOS DE CULTURA

SOLUBILIDADE DA PNEUMOLISINA DESTOXIFICADA (PdT) RECOMBINANTE OBTIDA EM Escherichia coli EMPREGANDO DIFERENTES INDUTORES E MEIOS DE CULTURA

CRIVELLENTI, M. C.; ARAÚJO, S. C.; FILHO, L. Z.; GONÇALVES, V. M.

Pôster:

O objetivo desse estudo foi a avaliação da solubilidade da proteínapneumolisina geneticamente destoxificada (PdT) recombinante obtida em Escherichiacoli produzida nos meios de cultura LB e HDF induzidos por IPTG, S-DAB e deautoindução (AI) induzidos por lactose. Durante os cultivos, alíquotas foram retiradasa cada hora para a leitura da densidade óptica (DO) a 600 nm, os pellets foramressuspendidos de modo que a concentração celular fosse a mesma em todas asamostras. As suspensões foram lisadas e centrifugadas para separação da fraçãosolúvel e insolúvel. A produção da PdT foi avaliada através da densitometria de bandados géis de SDS-PAGE. Os meios complexos LB e AI apresentaram produção solúvelsemelhante, enquanto os meios definidos HDF e S-DAB levaram à formação de corposde inclusão. Devido às suas características, o meio AI é a melhor opção para aprodução de PdT solúvel em biorreator.

O objetivo desse estudo foi a avaliação da solubilidade da proteínapneumolisina geneticamente destoxificada (PdT) recombinante obtida em Escherichiacoli produzida nos meios de cultura LB e HDF induzidos por IPTG, S-DAB e deautoindução (AI) induzidos por lactose. Durante os cultivos, alíquotas foram retiradasa cada hora para a leitura da densidade óptica (DO) a 600 nm, os pellets foramressuspendidos de modo que a concentração celular fosse a mesma em todas asamostras. As suspensões foram lisadas e centrifugadas para separação da fraçãosolúvel e insolúvel. A produção da PdT foi avaliada através da densitometria de bandados géis de SDS-PAGE. Os meios complexos LB e AI apresentaram produção solúvelsemelhante, enquanto os meios definidos HDF e S-DAB levaram à formação de corposde inclusão. Devido às suas características, o meio AI é a melhor opção para aprodução de PdT solúvel em biorreator.

Palavras-chave:

DOI: 10.5151/cobeq2018-PT.0618

Referências bibliográficas

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Como citar:

CRIVELLENTI, M. C.; ARAÚJO, S. C.; FILHO, L. Z.; GONÇALVES, V. M.; "SOLUBILIDADE DA PNEUMOLISINA DESTOXIFICADA (PdT) RECOMBINANTE OBTIDA EM Escherichia coli EMPREGANDO DIFERENTES INDUTORES E MEIOS DE CULTURA", p-2335-2338. In: . São Paulo: Blucher, 2018.
ISSN 23591757, DOI 10.5151/cobeq2018-PT.0618