Artigo Completo - Open Access.

Idioma principal

IMOBILIZAÇÃO DE BETA-GALACTOSIDASE UTILIZANDO A TÉCNICA CLEA (CROSS-LINKED ENZYME AGGREGATES)

ULRICH, L. G. ; MAFRA, A. C. O. ; TARDIOLI, P. W. ; RIBEIRO, M. P.A. ;

Artigo Completo:

Realizou-se a otimização da imobilização por agregados enzimáticos reticulados (Cross-Linked Enzyme Aggregates CLEAs) de β-galactosidase (EC 3.2.1.23) de Kluyveromyces lactis. A metodologia de preparo dos CLEAs consiste na precipitação da proteína e entrecruzamento com grupos amino reativos livres em sua superfície, via reação com um reagente bifuncional. Dessa forma, foram avaliados os rendimentos de imobilização de derivados preparados com diferentes agentes precipitantes (polietilenoglicol 400, álcool terc-butílico, acetona, dimetoxietano, etanol e sulfato de amônio), diferentes concentrações de agente entrecruzante (0, 0,3, 0,6 e 1 mM) e presença de proteína espaçadora soja nas proporções mgSoja/mgEnzima 2 e 4 e mmolGutaraldeído/gProteína Total 2, 2,5 e 3. O derivado que apresentou rendimento de imobilização máximo de 74,6% foi preparado utilizando álcool terc-butílico, glutaraldeído na razão 2 mmolG/gProteína Total e razão entre proteína espaçadora soja e enzima, respectivamente, 0,4 mg/0,2 mg.

Artigo Completo:

Palavras-chave: Cross-Linked Enzyme Aggregates,

Palavras-chave:

DOI: 10.5151/chemeng-cobeqic2017-298

Referências bibliográficas
  • [1] GAUR, R.; PANT, H.; JAIN, R.; KHARE, S. K. Galacto-oligosaccharide synthesis by immobilized Aspergillus oryzae β-galactosidase. Food Chemistry, v. 97, p. 426–430, 2006.
  • [2] LI, L.; LI, G.; CAO, L. C.; REN, G. H.; KONG, W.; WANG, S. D.; LIU, Y. H. Characterization of the cross-linked enzyme aggregates of a novel β-galactosidase, a potential catalyst for the synthesis of galacto-oligosaccharides. Journal of agricultural and food chemistry, v. 63, p. 894–901, 2015.
  • [3] MAFRA, A. C. O.; KOPP, W.; BELTRAME, M. B.; GIORDANO, R. D. L. C.; DE ARRUDA RIBEIRO, M. P.; TARDIOLI, P. W. Diffusion effects of bovine serum albumin on cross-linked aggregates of catalase. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, v. 133, p. 107–116, 2016.
  • [4] PANESAR, P. S.; KUMARI, S.; PANESAR, R. Potential applications of immobilized β-galactosidase in food processing industries. Enzyme Research, v. 2010, 2010.
  • [5] PEREIRA-RODRÍGUEZ, Á.; FERNÁNDEZ-LEIRO, R.; GONZÁLEZ-SISO, M. I.; CERDÁN, M. E.; BECERRA, M.; SANZ APARICIO, J. Structural basis of specificity in tetrameric Kluyveromyces lactis β-galactosidase. Journal of structural biology, v. 177, p. 392–401, 2012.
  • [6] RODRIGUEZ-COLINAS, B.; DE ABREU, M. A.; FERNANDEZ-ARROJO, L.; DE BEER, R.; POVEDA, A.; JIMENEZ-BARBERO, J.; PLOU, F J. Production of galacto-oligosaccharides by the β-galactosidase from Kluyveromyces lactis: Comparative analysis of permeabilized cells versus soluble enzyme. Journal of agricultural and food chemistry, v. 59, p. 10477–10484, 2011.
  • [7] ROSSETTO, B. P.; ZANIN, G. M.; DE MORAES, F. F. Determinação da Atividade da Enzima B-galactosidase por Lactose do Soro de Queijo. BBR-Biochemistry and Biotechnology Reports, v. 1, p. 28–32, 2013.
  • [8] SCHOEVAART, R.; WOLBERS, M. W.; GOLUBOVIC, M.; OTTENS, M.; KIEBOOM, A. P. G.; VAN RANTWIJK, F.; SHELDON, R. A. Preparation, optimization, and structures of cross‐linked enzyme aggregates (CLEAs). Biotechnology and Bioengineering, v. 87, p. 754–762, 2004.
  • [9] SHELDON, R. A. Cross-linked enzyme aggregates as industrial biocatalysts. Organic Process Research & Development, v. 15, p. 213–223, 2010.
  • [10] SHELDON, R. A., VAN PELT, S. Enzyme immobilization in biocatalysis: why, what and how. Chemical Society Reviews, v. 42, p. 6223–6235, 2013.
  • [11] TRINDER, P. Determination of glucose in blood using glucose oxidase with an alternative oxygen acceptor. Annals of clinical Biochemistry, v. 6, p. 24–27, 1969.
  • [12] TÜKEL, S. S.; HÜRREM, F.; YILDIRIM, D.; ALPTEKIN, Ö. Preparation of crosslinked enzyme aggregates (CLEA) of catalase and its characterization. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, v. 97, p. 252–257, 2013.
  • [13] WILSON, L.; BETANCOR, L.; FERNÁNDEZ-LORENTE, G.; FUENTES, M.; HIDALGO, A.; GUISÁN, J. M.; FERNÁNDEZ-LAFUENTE, R. Cross-linked aggregates of multimeric enzymes: a simple and efficient methodology to stabilize their quaternary structure. Biomacromolecules, v. 5, p. 814–817, 2004.
Como citar:

ULRICH, L. G.; MAFRA, A. C. O.; TARDIOLI, P. W.; RIBEIRO, M. P.A.; "IMOBILIZAÇÃO DE BETA-GALACTOSIDASE UTILIZANDO A TÉCNICA CLEA (CROSS-LINKED ENZYME AGGREGATES)", p. 1680-1685 . In: Anais do XII Congresso Brasileiro de Engenharia Química em Iniciação Científica [=Blucher Chemical Engineering Proceedings, v. 1, n.4]. ISSN Impresso: 2446-8711. São Paulo: Blucher, 2017.
ISSN 2359-1757, DOI 10.5151/chemeng-cobeqic2017-298

últimos 30 dias | último ano | desde a publicação


downloads


visualizações


indexações