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O presente trabalho teve como objetivo o estudo da separação econcentração do biossurfactante surfactina, sintetizado por fermentação pela bactériaBacillus subtilis, utilizando-se o processo de fracionamento em coluna de bolhas eespuma, a fim de se otimizar o enriquecimento e a recuperação do bioproduto. Oprocesso envolve a injeção de gás nitrogênio nas vazões de 20, 40 e 60 mL.min-1 pelabase da coluna de líquido que contém a solução de surfactina nas concentrações iniciaisde 240, 400 e 700 mg.L-1. No topo do equipamento forma-se uma coluna de espumaconcentrada no biossurfactante, o qual pode ser recuperado pelo rompimento mecânicoda espuma. A recuperação total de surfactina para diferentes condições experimentaisvariou de 80,5 a 98,3 %. O maior valor de enriquecimento foi alcançado para soluçõesdiluídas de surfactina operando a coluna a baixa vazão de gás e com temperaturarelativamente elevada. Os resultados indicaram que o processo que utiliza coluna debolhas e espuma se mostra promissor na etapa de concentração do biossurfactante.