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Os surfactantes são caracterizados como agentes ativos de superfície que reduzem a energia livre do sistema e a tensão superficial e interfacial dos líquidos. Visando um menor impacto ambiental dos tensoativos derivados do petróleo, os biossurfactantes ou tensoativos biológicos têm sido amplamente estudados a fim de viabiliza-los industrialmente. O presente trabalho busca avaliar a influência da temperatura (25; 30; 35; 40°C), no processo de produção de biossurfactante por Pseudomonas aeruginosa TGC01 em um meio de cultivo contendo 20g/L de glicerol PA. Foram analisados concentração de células, tensão superficial, índice de emulsificação, produtividade em células, velocidade específica de crescimento máxima e tempo de geração. Constatou-se que o crescimento das células do microrganismo e a produção de biossurfactante sofrem influência da temperatura sendo a de 30°C a de melhor eficiência.